PCR实验室建设四要素

2024-07-05 18:16:17 来源：互联网分类：电气知识

　　PCR实验室建设四要素

　　1、试剂制备区

　　用于制备检测试剂，该区域处于正压状态，目的是避免污染物外溢。该区域内部可分为三个区域：普通提取试剂制备区、PCR试剂制备区和PCR主反应液制备区，在常用提取试剂制备区，准备一些样品核酸提取所需的裂解液和提取液; PCR试剂制备区用于PCR试剂的制备和储存。例如，准备引物、探针和其他 PCR 试剂，为避免交叉污染，避免反复冻融，应将试剂储存液平均到一个较小的工作体积，储存在这个房间内以备后用：PCR主反应液制备区将进行主反应液( 除样品外。所有 PCR 所需试剂的混合)加入 PCR 管中。重要提示：请勿将其他房间的材料(包括扩增、模板和目标核酸或阳性对照、耗材或设备)带入试剂制备区。

　　2、制样区

　　该区无压力设置要求，该区域用于分割样品、碾磨、压碎和均质样品。由于在这些粉碎、碾磨和均质过程当中会产生气溶胶，因此阳性样品可能会污染后续操作，该区域应与后方区域严格分开，并应放置在与后方三个区域分开的单独房间内，样品制备区还可以设置专门的封闭区域或房间，用于样品接收和储存。该房间可以放置在冰箱中用于样品储存，并应与样品制备区的其他区域分开，样品制备区的人员不得进入试剂制备区。

　　3、核酸提取区域

　　核酸提取区域是样品核酸提取区域，该区域处于负压状态，目的是避免核酸外溢造成污染，样品制备区还包括从样品中提取和纯化核酸的区域和向装有PCR的主反应混合物管中加入核酸的操作区。添加样品后，尽快关闭 PCR 管盖，使用PCR板和塑料盖板时，阳性对照和含有目标序列的样品应与待测样品分开操作，以免加入模板时交叉污染。

　　重要提示：该房间内的所有物品不得带入试剂准备区。

　　4、扩增和产物检测区域

　　此区域用于 PCR 扩增和 PCR 分析，PER 仪表放置在该区域。房间保持负压，避免核酸外溢，该区域的人员必须始终穿着工作服

　　和手套，并在离开房间前脱下，以避免扩增子污染其他位置，用于放大和产品测试的所有设备都应指定给这个房间。

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