ATCC27661标准菌株原装0代菌株ATCC标准菌株

使用 - 80℃冰箱保存 ATCC 菌株时，需要注意以下几个方面的问题：
菌株准备
菌液浓度：确保用于保存的菌株处于对数生长期，此时的菌株活力较强。一般来说，菌液浓度应达到一定标准，例如对于细菌，通常要求菌液的 OD 值（光密度）在 0.6 - 0.8 左右，以保证有足够数量的活菌用于长期保存。
保护剂使用：添加合适的保护剂是非常关键的。常用的保护剂如甘油，其终浓度一般在 15% - 30% 之间。甘油浓度过高可能会对菌株产生毒性，过低则不能有效保护菌株免受冷冻损伤。在添加甘油时，要确保其与菌液充分混合均匀。
冻存管选择
材质与质量：应选用高质量、耐低温的冻存管，通常由聚丙烯等材质制成。优质的冻存管具有良好的密封性和耐低温性能，能防止在 - 80℃环境下破裂或泄漏。
规格合适：根据菌株的量选择合适规格的冻存管，一般常用的有 1.5 mL 或 2.0 mL 的冻存管，避免使用过大或过小的冻存管，以保证菌液在管内有合适的空间，且便于冻存和复苏操作。
冷冻过程
缓慢降温：为了减少冰晶对菌株细胞的损伤，应采用缓慢降温的方式。可以将装有菌株的冻存管先放入 - 20℃冰箱中预冷 2 - 4 小时，然后再转移至 - 80℃冰箱。也可以使用专门的冷冻盒，如含有异丙醇的梯度冷冻盒，它能以相对均匀的速度降温，使菌株更好地适应低温环境。
避免反复冻融：尽量避免对同一管菌株进行多次冻融，因为每次冻融过程都可能对菌株造成损伤，导致菌株活力下降或基因突变。如果需要使用多支冻存管中的菌株，应分别取出解冻，而不是将一支冻存管反复冻融。
冰箱维护与管理
温度监测：定期监测 - 80℃冰箱的温度，确保其温度稳定在 - 80℃左右，波动范围最好控制在 ±5℃以内。可以使用温度记录仪或温度计进行监测，并做好记录。如果发现温度异常，应及时查找原因并进行修复。
定期除霜：冰箱内的霜层会影响制冷效果，因此需要定期除霜。除霜时应注意避免对菌株造成影响，可以将菌株暂时转移至其他备用的 - 80℃冰箱或液氮罐中，待除霜完成、冰箱恢复正常温度后再放回。
空间规划：合理规划冰箱内的空间，将不同类型或来源的菌株分类存放，并做好标记。可以使用冻存架或冻存盒进行整理，以便于查找和取用菌株。同时，要留出一定的空间用于空气流通，以保证制冷效果均匀。
记录与标识
详细记录：建立详细的菌株保存记录，包括菌株的名称、ATCC 编号、保存日期、保存条件、冻存管数量等信息。记录还应包括菌株的来源、相关的实验记录以及任何与菌株特性变化有关的信息，以便在需要时进行查询和追溯。
清晰标识：在冻存管上用防水、耐低温的标记笔清晰地标注菌株的名称、ATCC 编号、保存日期等关键信息。也可以使用标签贴纸，但要确保贴纸在低温环境下不会脱落或模糊。此外，还可以在冻存架或冻存盒上进行标识，方便快速定位所需菌株。

微生物保藏中心的资源在农业领域应用广泛，涵盖土壤改良、作物生长促进、病虫害防治等方面，具体如下：
土壤改良与肥力提升
增加土壤养分：保藏中心的一些微生物，如根瘤菌、固氮菌等，具有固氮作用，能将空气中的氮气转化为植物可吸收的氮素营养。解磷菌、解钾菌则可分解土壤中难溶性的磷、钾化合物，使其转化为植物可利用的形态，增加土壤养分有效性，提高土壤肥力。
改善土壤结构：某些微生物在生长过程中会分泌胞外多糖等物质，这些物质可以将土壤颗粒黏结在一起，形成稳定的团聚体，改善土壤的通气性、透水性和保水性，有利于农作物根系生长和发育。
促进作物生长
产生植物生长激素：保藏的一些微生物，如芽孢杆菌、假单胞菌等，能够产生生长素、细胞分裂素、赤霉素等植物生长激素，促进作物种子萌发、根系生长、植株发育，提高作物的产量和品质。
增强植物抗逆性：部分微生物可诱导植物产生系统抗性，增强植物对干旱、高温、低温等逆境条件的适应能力。例如，一些丛枝菌根真菌能够与植物根系形成共生体，帮助植物吸收更多的水分和养分，提高植物在干旱条件下的生存能力。
病虫害防治
拮抗病原微生物：微生物保藏中心有许多具有拮抗作用的微生物，如木霉菌、链霉菌等，它们可以通过分泌抗生素、酶类等物质抑制或杀死植物病原微生物，减少病虫害的发生。
诱导植物抗病性：一些有益微生物可以激活植物自身的免疫系统，使植物产生抗病性。例如，用荧光假单胞菌处理植物种子或根系，可诱导植物产生对多种病原菌的抗性，降低病害发生率。
农产品保鲜与加工
生物保鲜：某些微生物产生的抗菌物质可用于农产品的生物保鲜。例如，乳酸菌产生的细菌素具有抑制腐败菌和病原菌的作用，将其应用于水果、蔬菜、肉类等农产品的保鲜，可延长农产品的货架期。
食品发酵：在农产品加工中，微生物保藏中心的多种微生物菌株被广泛用于发酵过程，如酿酒酵母用于酒类发酵，乳酸菌用于酸奶、泡菜等发酵食品的生产，这些微生物不仅能改善食品的风味和品质，还能提高食品的营养价值和保存性。

美国典型培养物保藏中心（ATCC）的发展历程如下：
起源与成立：其前身可追溯至 1921 年，当时美国陆军医学博物馆接收了著名的温斯洛培养物收藏，该收藏由美国细菌学家协会的华盛顿特区成员负责照料。1925 年，ATCC 正式成立，成为一个官方实体，当时保藏的培养物被转移到芝加哥的麦考密克研究所。
早期发展：1937 年，培养物又迁回华盛顿，随着收藏的培养物不断增加和多样化，空间逐渐变得紧张，ATCC 经历了一系列搬迁，以寻找更大的场地来容纳不断增长的生物资源。
中期发展：在成立后的几十年里，ATCC 主要依赖政府资金维持运营。它逐渐发展成为世界上最大的生物资源中心，保藏的生物材料涵盖细菌、真菌、病毒、细胞系等多种类型。1981 年，ATCC 有 39,000 多培养物发放给全世界的科学工作者，并成功地用冷冻和冷冻干燥的方法保存各种细胞品系。
现代转型：1993 年，雷蒙德・赛普斯担任 ATCC 的负责人，他致力于重振该组织，提升其在生物科学领域的知名度，并大力倡导生物研究的标准制定。在他的领导下，ATCC 从一个单纯的非营利性保藏机构转变为推动生物科学发展的重要资源中心。到 21 世纪 10 年代，ATCC 已成功实现转型，在生物科学研究领域发挥着关键作用。
设施与合作：如今，ATCC 总部位于弗吉尼亚州马纳萨斯，拥有一座 126,000 平方英尺的建筑，其中包括 18,000 平方英尺的生物材料保藏库和 35,000 平方英尺的实验室空间。ATCC 还与全球多个国际培养物保藏中心建立了合作关系，如英国的国家植物病原菌收集中心、比利时的微生物协调收集中心、德国微生物菌种保藏中心、日本生物资源研究收藏中心等，共同推动全球生物资源的保藏和研究工作。

菌种的培育和复苏是微生物学实验和应用中的重要环节，以下分别介绍其一般步骤：
菌种培育
培养基制备
根据所培养菌种的营养需求，选择合适的培养基配方。例如，培养细菌常用牛肉膏蛋白胨培养基，培养真菌可用马铃薯葡萄糖培养基。
准确称量各成分，溶解于适量蒸馏水中，调节 pH 值至适宜范围。如细菌培养基一般 pH 值在 7.0 - 7.5，真菌培养基 pH 值在 5.0 - 6.0。
分装到培养容器中，如试管、三角瓶等，进行高压蒸汽灭菌。一般在 121℃，103.4kPa 条件下灭菌 15 - 20 分钟。
接种
在无菌条件下，采用适当的接种方法将菌种接入培养基。常用的接种方法有平板划线法、涂布平板法、穿刺接种法等。
平板划线法是用接种环蘸取少量菌液，在平板培养基表面连续划线，使菌种分散，经培养后形成单个菌落。涂布平板法是将菌液均匀涂布在平板培养基表面，适用于需计数的菌种。穿刺接种法是用接种针将菌种穿刺接入固体培养基中，常用于保存厌氧菌种或观察细菌的运动性。
培养
根据菌种的特性，选择适宜的培养条件，包括温度、湿度、光照和气体环境等。如大肠杆菌一般在 37℃培养，而霉菌通常在 25 - 28℃培养。
需氧菌一般在有氧条件下培养，可采用摇床培养或静置培养。厌氧菌则需在无氧环境中培养，可使用厌氧培养箱或厌氧袋等设备。
菌种复苏
准备工作
查阅菌种的相关资料，了解其特性、保存条件和复苏方法。
准备好所需的培养基、培养设备以及无菌操作工具等。
取出菌种
从低温保存设备（如冰箱、液氮罐等）中取出保存的菌种。如果是冷冻干燥保存的菌种，需先在室温下放置片刻，使其恢复至室温。
接种培养
对于冷冻保存的菌种，可直接将菌种接种到适宜的培养基上。如果是冷冻干燥保存的菌种，需先加入适量的无菌水或培养基，轻轻振荡使其溶解，然后再接种到培养基上。
按照菌种的培养要求，将接种后的培养基置于合适的培养条件下进行培养。在培养过程中，要密切观察菌种的生长情况，如出现污染或生长异常，应及时采取措施。
不同种类的菌种在培育和复苏过程中可能会有一些特殊要求和注意事项，需要根据具体菌种的特性进行操作，以确保菌种的活性和纯度。

除了 ATCC，以下是一些类似的保藏中心及其应用：
欧洲典型培养物保藏中心（ECACC）：是欧洲重要的细胞库之一。其细胞系涵盖癌症、遗传疾病及转基因研究等领域，支持欧洲和全球科研机构。它强调可追溯性和质量控制，为科研提供高质量的细胞资源，可用于基础生物学研究、药物研发、疾病模型构建等。例如在癌症研究中，提供的癌细胞系可用于研究癌症的发生发展机制、筛选抗癌药物等。
日本细胞资源保藏中心（JCRB）：专注于亚洲人群相关的细胞系，以癌症和人类疾病相关的细胞系为主，提供多样的癌症研究细胞资源以及人类疾病模型细胞，资源的生物信息学支持非常强大。可用于针对亚洲人群疾病特点的研究，如在研究亚洲人群高发的胃癌、肝癌等疾病时，利用其保藏的相关细胞系建立疾病模型，探索疾病的发病机制、寻找诊断标志物和治疗靶点等。
德国微生物与细胞培养物保藏中心（DSMZ）：是欧洲历史悠久且种类丰富的细胞库，以肿瘤研究细胞系的丰富性及质量可靠性著称，尤其在白血病和淋巴瘤相关细胞系上非常全面，同时还提供微生物资源。在肿瘤研究中，为白血病和淋巴瘤等疾病的基础研究、药物研发提供了重要的细胞模型，有助于深入了解疾病的病理生理过程，开发针对性的治疗药物。此外，其微生物资源也可用于微生物学、生物技术等领域的研究。
韩国细胞系银行（KCLB）：是韩国最大的细胞库，拥有丰富的韩国人群相关的细胞系，并支持亚洲遗传背景下的研究，尤其在药物筛选和基因组学研究方面得到广泛应用。在药物研发中，利用韩国人群相关细胞系进行药物筛选，可更好地模拟药物在亚洲人群中的作用效果，提高药物研发的成功率。同时，在基因组学研究中，为揭示亚洲人群遗传特征与疾病的关系提供了重要的细胞资源。
中国科学院典型培养物保藏委员会（CGMCC）：是中国最大的生物资源中心，涵盖细胞系和微生物资源。专注于中国本土资源的收集和保存，尤其是中国人相关的细胞系和传统中药相关研究样本，促进本地化的生物医学研究。在中药研究方面，其保存的与传统中药相关的微生物资源可用于研究中药的发酵炮制、中药活性成分的生物转化等。对于中国人相关细胞系的研究，有助于深入了解中国人群疾病的遗传基础和发病机制，为个性化医疗提供支持。
中国食品药品检定研究院（NIFDC）：是国家级药物检测和生物资源中心，提供药物研发、毒理学和质量控制研究所需的细胞系，严格遵循中国药品审评标准，资源主要用于药物临床试验和生产监督。在药物研发过程中，为药物的安全性评价、有效性验证提供细胞模型，确保药物符合质量标准和审评要求。例如，在新药的毒理学研究中，利用其提供的细胞系进行药物毒性测试，评估药物对不同细胞类型的影响，为临床用药的安全性提供依据。
法国巴斯德研究所（Pasteur Institute Cell Bank）：历史悠久，擅长微生物学、免疫学和传染病研究的资源库，特别是与病毒感染相关的细胞系，在疫苗研发和传染病防控领域有重要影响。在传染病研究和疫苗研发中，提供的病毒感染相关细胞系可用于研究病毒的感染机制、病毒与宿主细胞的相互作用等，为开发有效的疫苗和治疗方法提供关键的实验模型。例如，在研发流感疫苗、新冠疫苗等过程中，利用相关细胞系进行病毒培养、疫苗抗原筛选和免疫原性评估等工作。

零下20℃冰箱一般不适合用于长期保存 ATCC 菌株。虽然 - 20℃冰箱可用于短期保存某些菌株，但长期保存可能会导致菌株活力下降、基因突变等问题，原因如下：
冰晶损伤：在 - 20℃条件下，菌株细胞内的水分仍有可能形成较大的冰晶，这些冰晶会破坏细胞的结构，如细胞膜、细胞器等，从而影响菌株的活力和生理特性。随着时间的推移，这种损伤会逐渐积累，导致菌株的存活率降低，甚至可能使菌株失去某些关键的生物学功能。
生化反应仍可发生：-20℃并不能完全抑制所有的生化反应。菌株细胞内的一些酶仍然可能具有一定的活性，从而引发细胞内的代谢反应。这些反应可能会消耗细胞内的营养物质，产生一些对细胞有害的代谢产物，进而影响菌株的长期生存。
稳定性问题：-20℃冰箱的温度稳定性相对较差，容易受到外界环境因素的影响，如冰箱门的开关、电源波动等。温度的波动可能会导致菌株经历反复的冻融过程，即使是微小的温度变化也可能对菌株造成损害，进一步降低菌株的存活率和稳定性。
相比之下，-80℃冰箱或液氮罐等低温保存条件能够更好地抑制冰晶形成和生化反应，提供更稳定的保存环境，更适合 ATCC 菌株的长期保存。